Anti-PCNA抗體（鼠單抗）

Anti-PCNA Antibody（Monoclonal Antibody from Mouse）

● 產品簡介

增殖細胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE（系統(tǒng)性紅斑狼瘡）患者的血清中首次發(fā)現(xiàn)并命名，因其只存在于正常增殖細胞及腫瘤細胞內而得名，以后的研究發(fā)現(xiàn)PCNA與細胞DNA合成關系密切，在細胞增殖的啟動上起重要作用，是反映細胞增殖狀態(tài)的良好指標。PCNA是一種分子量為36 kD的蛋白質，在細胞核內合成，并存在于細胞核內，為DNA聚合酶δ的輔助蛋白，該蛋白對聚合酶的持續(xù)合成能力起重要作用。在細胞核內存在可溶性與不溶性兩種PCNA，可溶性PCNA在細胞周期各期中均有表達，其量在DNA合成過程中不發(fā)生明顯變化，易被去污劑提取、甲醇破壞；不溶性PCNA較穩(wěn)定，不易被去污劑洗脫、甲醇破壞，這種PCNA在G0～G1期細胞中無明顯表達，G1晚期，其表達大幅度增加，S期達到高峰，G2～M期明顯下降，其量的變化與DNA合成一致，檢測其在細胞中的表達，可作為評價細胞增殖狀態(tài)的一個指標。

注：WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence

本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測，至少可以檢測50次。

● 貯存形式：

穩(wěn)定溶液，1 mg/ml抗體溶于PBS，50%甘油，pH7.2。

● 保存及運輸條件：

-20℃保存，一年有效；避免反復凍融；濕冰運輸。

● 使用說明：

1. Western Blot雜交(ECL顯色)：1:2000-5000稀釋，常溫孵育1-2 h或4℃過夜。

2. 免疫熒光（IF）和免疫組化（IHC）：1:200-1000稀釋。

● 實驗示例：

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lane 1，5：ECL Marker；lane 2：總蛋白TP；lane 3：細胞漿蛋白，C-Pr；lane 4：細胞核蛋白，N-Pr

 Jurkat蛋白提取：總蛋用RIPA（貨號：RL1020 ）提取。胞漿蛋白和核蛋白用動物細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑盒（貨號：RTD8301）提取。

 制膠和電泳：RealPAGE plus彩色凝膠快速制備試劑盒（貨號：RTD6132-15）；200 V 55 min

 轉膜：NC膜，1×RealBlot快速轉膜液 400 mA 37 min

 封閉：Western無蛋白快速封閉液（貨號：PF1070） RT封閉 20 min

 一抗： Anti-PCNA抗體（鼠單抗）（貨號：APM5012） 1：5000

 二抗：HRP標記羊抗鼠IgG（貨號：HGM1060）1：5000

 ECL發(fā)光：RealECL發(fā)光液（貨號：EC2520）；化學發(fā)光成像系統(tǒng)（貨號：RT523）拍照。