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RealRed核酸染色劑(GelRed)
● 產(chǎn)品規(guī)格:
產(chǎn)品編號
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產(chǎn)品名稱
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包裝
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貯存
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運(yùn)輸
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GR001
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RealRed核酸凝膠染色劑
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0.5 ml
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4-8℃
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常溫
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-
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說明書
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一份
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● 簡介:
RealRed?是一種可以替代溴化乙錠(EB)的紅色熒光核酸染色劑,與GelRed是類似產(chǎn)品。與SYBR或EB相比,RealRed最顯著的特性是其在多種條件下的高靈敏性和穩(wěn)定性。另外相對EB或SYBR,RealRed?誘導(dǎo)突變的能力極低。染色劑溶解于水中,為10000×濃度。
● 貯存及運(yùn)輸:
4-8℃避光保存2年;常溫運(yùn)輸。
● RealRed的使用方法:
注意:染料使用前應(yīng)在室溫下徹底融化混勻后使用。
1. RealRed預(yù)染方法(推薦方法):
1.1
將RealRed試劑按1:10000溶于瓊脂糖凝膠溶液中,充分混勻。(例如:將5 μl RealRed 試劑加入到50 ml 凝膠溶液中)。注:由于RealRed 具有出色的熱穩(wěn)定性,可將試劑直接加入高溫的凝膠溶液中,而不用等凝膠溶液冷卻后再加入。
1.2 澆制凝膠并使其凝固后上樣電泳。
注意:使用這種預(yù)先加入染色劑的瓊脂糖凝膠,每次不易加入太多的 DNA 樣品,否則容易造成飽和現(xiàn)象,可以做多個(gè)不同濃度的 DNA Marker,以確定最佳 DNA 上樣量。
1.3 紫外下觀察結(jié)果。
注:如果始終出現(xiàn)拖尾或是條帶無法分離的現(xiàn)象,您可以使用后染法對DNA染色,以確認(rèn)問題是否與染色劑有關(guān)。如果使用后染法問題依舊存在,則說明問題與染色劑無關(guān),請嘗試減少核酸的上樣量后進(jìn)行電泳。
2. RealRed后染方法:
2.1 用H2O將RealRed稀釋約3,300倍到0.1MNacl中,制成3×染色溶液。(例如:將15 μl RealRed和5ml的1MNaCl加入到45 ml H2O中)。注:RealRed 1×染色溶液同樣可用于后染,但其靈敏度要低于3×染色溶液。
2.2
將凝膠小心地放入合適的容器中,如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3×染色溶液浸沒凝膠。
2.3 在室溫下輕輕地?fù)u動凝膠板,最佳的染膠時(shí)間為30
分鐘,這取決于凝膠板的厚度、瓊脂糖或聚丙烯酰胺的濃度和 DNA 的長短。凝膠越厚或瓊脂糖的濃度越高,染色所需要的時(shí)間就越長。注:染色溶液至少可重復(fù)使用2-3次。如果不是立即再用的話,建議將用過的染色溶液冷藏保存。
2.4
紫外下觀察結(jié)果。