PCR染料添加劑(10×)
● 儲存和運輸:-20℃保存;常溫運輸
● 貨號:RTC3106
● 產(chǎn)品包裝:
5×1.5 ml
● 產(chǎn)品簡介
PCR染料添加劑為含有紅色染料和助沉劑的混合物,按照10倍體積稀釋于PCR反應(yīng)體系中,PCR結(jié)束后可以直接上樣電泳,不用再與loading buffer混合,方便快捷。特有的紅色染料不會影響Taq酶活性,電泳時指示前沿為紅色。
● 反應(yīng)舉例:
注意:以下舉例為常規(guī)PCR反應(yīng)系統(tǒng),僅供參考。實際反應(yīng)條件因模板、引物等的結(jié)構(gòu)不同而各異,需根據(jù)模板、目的片段的大小、堿基序列和引物長短等具體情況,設(shè)定最佳反應(yīng)條件。
以人基因組DNA為模板,擴增1 kb的片段
1. 反應(yīng)體系的建立:50μl反應(yīng)體系如下(可根據(jù)比例放大或縮小反應(yīng)體系):
Template
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<1mg
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Primer 1(10 mM)
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1 ml
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Primer 2(10 mM)
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1 ml
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10×Taq Buffer
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5 ml
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dNTP
Mixture(10 mM)
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1 ml
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Taq (5 U/ml)
PCR染料添加劑(10×)
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0.5 ml
5
μl
水至50μl
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2.
PCR反應(yīng)循環(huán)的設(shè)置:
94℃ 3 min
94℃ 30 sec
55℃30 sec 30
cycles
72℃ 1 min
72℃5 min
3.
結(jié)果檢測:反應(yīng)結(jié)束后取5μl反應(yīng)產(chǎn)物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。
注:紅色指示染料電泳中的遷移速度略快于溴酚藍。