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核酸快速高靈敏度染色試劑盒

核酸快速高靈敏度染色試劑盒

產(chǎn)品編號(hào):RTS5101

產(chǎn)品規(guī)格:25次

數(shù)量
價(jià)格 ¥450

核酸快速高靈敏度染色試劑盒

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

貯存

RTS5101

25

常溫

儲(chǔ)存、運(yùn)輸及效期

常溫保存;常溫運(yùn)輸;有效期一年。

產(chǎn)品簡介

核酸快速高靈敏度染色試劑盒(Fast and High Sensitivity Stain Kit for Nucleic Acids)是一種快速簡單、可用于聚丙烯酰胺凝膠中的核酸檢測(cè)的試劑盒。該方法檢測(cè)靈敏度比 EB 高達(dá) 200 倍,能檢測(cè)到10ng的 DNA條帶,常用于檢測(cè) SSR 標(biāo)記、SNP 標(biāo)記等。

本試劑盒可足夠用于25塊常規(guī)的8×10cm凝膠的染色。

說明書后附有實(shí)驗(yàn)記錄表格,方便記錄實(shí)驗(yàn)步驟。

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貯存

RTS5101-1

試劑A-增敏液(10×)

250 ml

常溫

RTS5101-2

試劑B-加速液(10×)

250 ml

常溫

RTS5101-3

試劑C-染色溶液(100×)

26 ml

常溫,避光

RTS5101-4

試劑D-基本顯色液(10×)

250 ml

常溫

RTS5101-5

試劑E-顯色加速液(500×)

5 ml

常溫,避光

● 注意事項(xiàng):

1. 由于染色非常靈敏,操作時(shí)請(qǐng)注意盡量使用高純度的水,并確保所使用的器皿非常清潔,最好使用潔凈的玻璃器皿。操作時(shí)必須戴手套,避免皮膚和凝膠直接接觸。

2. 需自備無水乙醇及MilliQ級(jí)純水。

3. 下述使用說明中各種溶液的使用量適用于大小為8×10cm厚度為0.75-1mm的凝膠。對(duì)于更大的凝膠,各種溶液的使用量需按凝膠面積的比例放大,對(duì)于更厚的凝膠,作用時(shí)間需按照厚度的比例適當(dāng)延長。

4. 本說明書所指的常溫溫度為20-25,操作溫度較低時(shí)由于溶液的擴(kuò)散能力下降,各步驟需適當(dāng)延長時(shí)間。

5. 基本顯色液(10×)在低溫環(huán)境下可能會(huì)出現(xiàn)沉淀,可在37℃水浴中溶解,并充分混勻后使用。

使用方法:

. 漂洗步驟:

電泳結(jié)束后,凝膠中加入100 ml MilliQ級(jí)純水,在搖床上常溫?fù)u動(dòng)2分鐘,搖動(dòng)速度為60-70rpm;重復(fù)此步驟1

. 染色步驟:

2.1 染色:

棄水,加入100 ml即用型染色液,在搖床上常溫?fù)u動(dòng)5分鐘,搖動(dòng)速度為60-70 rpm。  

即用型染色液配制量  100 ml

超純水

79 ml

試劑A-增敏液(10×)

10 ml

試劑B-加速液(10×)

10 ml

試劑C-染色溶液(100×)

1 ml

注:即用型染色液配制后需在20分鐘內(nèi)使用。

2.2 水洗滌:

棄原有溶液,加入100 ml MilliQ級(jí)純水或雙蒸水,在搖床上室溫?fù)u動(dòng)15-20秒,搖動(dòng)速度為60-70rpm。

注意:水洗滌的時(shí)間不能超過20。

. 顯色步驟:

棄水,加入100 ml顯色液,在搖床上室溫?fù)u動(dòng)3-10分鐘,直至出現(xiàn)比較理想的預(yù)期核酸條帶,搖動(dòng)速度為60-70rpm。

顯色液配制量                 100 ml

超純水

89.8 ml

試劑D-基本顯色液(10×)

10 ml

試劑E-顯色加速液(500×)

0.2 ml

注:顯色加速液(500X)有刺激性氣味,建議在通風(fēng)櫥內(nèi)操作;

顯色液配制后需在20分鐘內(nèi)使用。

終止步驟:

棄顯色液,加入100 ml MilliQ級(jí)純水,在搖床上常溫?fù)u動(dòng)3-5分鐘,搖動(dòng)速度為60-70 rpm。

. 保存:

可在MilliQ級(jí)純水中保存;或采用適當(dāng)?shù)姆绞街苽涑筛赡z。

常見問題:

背景太深:

1.1 顯色時(shí)間過長。通常顯色反應(yīng)會(huì)在10分鐘內(nèi)結(jié)束,顯色反應(yīng)時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致背景很深。

1.2水的純度太低。需使用大于16 MΩ·cm的高純度水。

核酸條帶非常淺:

2.1 染色后水洗滌時(shí)間過長。在染色溶液染色后需嚴(yán)格控制水洗滌的時(shí)間,水洗滌的時(shí)間不能超過20秒,否則會(huì)導(dǎo)致過多的染色離子被洗去,導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度下降。

2.2顯色加速液(500×)失效。顯色加速液(500×)不能低溫保存,低溫保存會(huì)導(dǎo)致加速液失效。

凝膠上出現(xiàn)小點(diǎn)或其它非核酸的痕跡:

3.1 凝膠沒有充分被溶液浸沒。請(qǐng)注意選擇大小合適的容器,并加入足量的各種溶液,同時(shí)需保持適當(dāng)?shù)幕靹蛩俣却_保凝膠可以被溶液浸沒。

3.2 用于染色的容器沒有充分洗滌干凈。容器需先用洗滌劑充分洗滌,隨后用自來水充分沖洗,最后用高純度水再洗滌數(shù)次。該容器最好能專用于染色,并注意避免各種可能的污染。

3.3 指紋或其它壓痕。請(qǐng)注意戴手套操作,切勿直接接觸皮膚。操作時(shí)請(qǐng)注意盡量勿擠壓、折疊或摩擦凝膠。

3.4 有金屬物質(zhì)接觸凝膠。金屬物質(zhì)例如金屬鑷子等接觸凝膠會(huì)出現(xiàn)非特異性痕跡。

 

實(shí)驗(yàn)記錄表格

實(shí)驗(yàn)日期:

 

 

25-30分鐘

標(biāo)記√

起始時(shí)間

漂洗步驟

水漂洗

2×2 min

 

 

染色步驟

 

 

 

 

 

染色

5 min

 

 

 

水漂洗

1 min

 

 

顯色步驟

顯色

3-10 min

 

 

終止步驟

水漂洗

5 min

 

 

保存

 

 

 

 

 


實(shí)驗(yàn)示例:

1 雙鏈DNA染色:


2 單鏈DNA/RNA染色:



使用RTS5101 核酸快速高靈敏度染色試劑盒產(chǎn)品發(fā)表部分文章列表:

1. [2022 IF=8.4] A novel label-free fluorescence aptasensor for dopamine detection based on an Exonuclease III- and SYBR Green I- aided amplification strategy. 

AuthorYanxian Wang, Kai Kang, Sui Wang,Weijun Kang, Cheng Cheng, Ling Mei Niu,Zhiyong Guo. 

Journal: Sensors and Actuators B: Chemical.  2019, 305:127348

Institution:Ningbo University

Paper linkhttps://doi.org/10.1016/j.snb.2019.127348

2. [2022 IF=8.4] A robust photoluminescence screening assay identifies uracil-DNA glycosylase inhibitors against prostate cancer. 

AuthorGuodong Li,Chung-Hang Leung. 

Journal: Chemical Science 2020, 11,1750–1760  

Paper linkhttps://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8148385

 

3. [2022 IF=6.0] A novel resonance Rayleigh scattering aptasensor for dopamine detection based on an Exonuclease III assisted signal ampli?cation by G – quadruplex nanowires formation 

AuthorYanxian Wang, Kai Kang, Sui Wang,LiMa, Weijun Kang,Xue Hui Liu, Ling Mei Niu , Zhiyong Guo

Journal: Arabian Journal of Chemistry (2020) 13, 6598–6605 

Institution:Ningbo University

Paper linkhttps://doi.org/10.1016/j.arabjc.2020.06.016

 

4. [2022 IF=6] A novel ?uorescent sensor based on aptamer recognition and DNA walker ampli?cation strategy and its determination of 17b-estradiol.

Author: Yajun Zhang, Licong Jia, Wei Wang, Meng Jiang, Hongying Zhang, LingMei Niu

Journal: Arabian Journal of Chemistry. 16 (2023) 105340.

Institution:School of Public Health, Hebei Medical University

Paper linkhttps://doi.org/10.1016/j.arabjc.2023.105340

 

5. [2022 IF=5.1] Repurposing sodium stibogluconate as an uracil DNA glycosylase inhibitor against prostate cancer using a time-resolved oligonucleotide-based drug screening platform.

Author: Sang-Cuo Nao, Le-Sheng Huang, Daniel Shiu-Hin Chan, Xueliang Wang, Guo-Dong Li, Jia Wu, Chun-Yuen Wong, Wanhe Wang, Chung-Hang Leung

Journal: Bioorganic Chemistry 144 (2024) 107176.

Institution:University of Macau

Paper linkhttps://doi.org/10.1016/j.bioorg.2024.107176  

 


 
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