PCR產(chǎn)物純化試劑盒（目錄號：RTP2202）

試劑盒內(nèi)容及保存：

儲存條件：

本試劑盒在室溫（15–25℃）干燥條件下，可保存12個月；更長時間的保存可置于2–8℃。（注意：當(dāng)?shù)蜏刭A存時，使用前應(yīng)先將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫中放置一段時間，必要時可在37℃水浴中預(yù)熱10-20分鐘，以平衡溶液溫度。）

產(chǎn)品簡介：

本試劑盒采用離心吸附柱結(jié)合獨特的緩沖液系統(tǒng)，從酶切、PCR等反應(yīng)溶液中純化DNA片段，同時除去蛋白質(zhì)、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。使用本試劑盒可回收100bp–10kb的DNA片段，回收率大于80%（<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率為30－50 %）。

每個吸附柱每次最多可吸附的DNA量約為10 μg。

使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實驗。

產(chǎn)品特點：

1 結(jié)合液PB為亮黃色，便于觀察體系的pH是否合適。

2 操作快捷，單個樣品操作少于10分鐘。

操作步驟：

如非指出，所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

1 在PCR反應(yīng)液中直接加入5倍體積的PB液，顛倒混勻后，全部加入到吸附柱CA2中，10,000g離心30-60秒，到掉收集管中的廢液，將吸附柱CA2重新放入收集管中。

注：● 如果PCR反應(yīng)體系使用了石蠟油，無需去除，但要使用10倍體積的PB液。

● 如果反應(yīng)體系小于50μl，用水補至50μl體系，再加入PB液。

● 如果體系體積大于700μl，請分次上柱，保證全部溶液均加入到吸附柱中。

2 向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），10,000g離心30-60秒，倒掉廢液，將吸附柱重新放入收集管中。

3 向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW，10,000g離心30-60秒，倒掉廢液。

4 將離心吸附柱CA2放回收集管中，10,000g離心2分鐘，盡量除去漂洗液。

注意：此步必不可少！如果漂洗液有殘留，將會影響回收效率和DNA質(zhì)量，進而影響下游實驗；離心后將吸附柱蓋子打開，室溫放置2分鐘，這樣將有助于徹底揮發(fā)殘余乙醇。

5 將吸附柱放到一個干凈離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加適量洗脫緩沖液EB，室溫放置2分鐘。10,000g離心2分鐘收集DNA溶液。

注意：

● 可將洗脫緩沖液EB預(yù)熱到60-70℃后再加到吸附膜上，這樣可以提高洗脫效率。

● CA2柱的洗脫體積不應(yīng)少于20 μl，體積過小將會降低回收效率。

● 洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會降低洗脫效率

6 DNA產(chǎn)物-20℃保存。

RTP2202 PCR產(chǎn)物純化試劑盒發(fā)表文章

1. [2012 IF=0.903] T Polymorphisms in major histocompatibility complex class IIa genes are associated with resistance to infectious hematopoietic necrosis in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss (Walbaum, 1792).

Author: Z. Liu, D.-D. Hu, S.-J. Shao, J.-Q. Huang, J.-F. Wang and J. Yang

Product: RTP2202 PCR產(chǎn)物純化試劑盒

Journal: J. Appl. Ichthyol. 29 (2013), 1234–1240

Institution：College of Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University

Paper link：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/jai.12326

2. [2012 IF=1.958] Cloning, bioinformatics and the enzyme activity analyses of a phenylalanine ammonia-lyase gene involved in dragon’s blood biosynthesis in Dracaena cambodiana.

Author: Xing-Hong Wang，Changhe Zhang

Product: RTP2202 PCR產(chǎn)物純化試劑盒

Journal: Mol Biol Rep (2013) 40:97–107

Institution：Yunnan Institute of Microbiology, Yunnan University

Paper link：https://link.springer.com/article/10.1007/s11033-012-2032-y

3. [2015 IF=1.32] Association between MHC II beta chain gene polymorphisms and resistance to infectious haematopoietic necrosis virus in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792).

Author: Juan Yang, Zhe Liu, Hai-Na Shi, Jiu-Pan Zhang, Jian-Fu Wang, Jin-Qiang Huang & Yu-Jun Kang

Product: RTP2202 PCR產(chǎn)物純化試劑盒

Journal: Aquaculture Research, 2016, 47, 570–578

Institution：College of Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University

Paper link： https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/are.12516