植物凝膠(Phytagel)
●產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
Phytagel又名Gellan gum,Gelrite。是一種瓊脂的替代物,是細(xì)菌(假單孢菌Pseudomonas elodea)經(jīng)過(guò)發(fā)酵生產(chǎn)的,含有葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖等物質(zhì),具有無(wú)色、透亮和高韌性的特點(diǎn),是配制植物組織培養(yǎng)基和微生物培養(yǎng)基的主要成分。由于其克服了傳統(tǒng)瓊脂在植物組織培養(yǎng)中的固有缺陷為植物學(xué)研究帶來(lái)了一場(chǎng)新的革命,已經(jīng)成為了國(guó)際公認(rèn)的植物組培首選產(chǎn)品。
●常用工作濃度:
植物培養(yǎng)基中1.5-2.5g/L;微生物培養(yǎng)基中10g/L。
●優(yōu)點(diǎn):
1. 高透明度:It offers clear solid medium after gelling due to a higher clarity than agar allowing easy observation inside the medium.
2. 用量更少:A smaller amount of gellan gum offers gel strength equal to agar.
3. 促進(jìn)生長(zhǎng):It can accelerate growth rate of plant bodies.
●使用注意事項(xiàng):
1. 植物凝膠不易溶解于冷水中,滅菌前請(qǐng)搖勻。
2. 植物凝膠的凝固程度主要與三個(gè)因素有關(guān):
a 離子強(qiáng)度:Phytagel的凝固需要陽(yáng)離子尤其是二價(jià)陽(yáng)離子的存在。一般植物培養(yǎng)基中的鈣離子和鎂離子的濃度足以讓phytagel凝固。微生物學(xué)研究所用的低鹽培養(yǎng)基中為了使Phytagel凝固,通常需要另外加入鈣鹽、鎂鹽或使用高濃度的Phytagel。
b 培養(yǎng)基的pH值:pH5.8是其凝固的最適pH值,pH低于5.8不易凝固。由于高壓滅菌會(huì)使培養(yǎng)基的pH降低0.3-0.5單位,因此滅菌前培養(yǎng)基的pH值要用MES和KOH調(diào)節(jié)到pH5.8,由于MES的緩沖能力,滅菌后不會(huì)使pH降低。建議MES 1升培養(yǎng)基中加0.5克(終濃度為2.5 mM)
注:培養(yǎng)基中加入植物凝膠后,用KOH調(diào)節(jié)pH到5.8。避免先調(diào)節(jié)pH后加植物凝膠,因?yàn)橹参锬z會(huì)影響培養(yǎng)基的pH。
c 凝膠用量:一般說(shuō)來(lái),對(duì)大多數(shù)植物培養(yǎng)基來(lái)說(shuō),1升培養(yǎng)基中凝膠用量3g(0.3%)足矣。特殊要求請(qǐng)適當(dāng)調(diào)整凝膠用量。
附錄:植物凝膠與瓊脂使用對(duì)比
|
[Ca2+]
|
[Mg2+]
|
Phytagel
|
Agar
|
pH
|
MS培養(yǎng)基
|
2.99mM
|
1.50mM
|
0.3%
|
1%
|
5.8
|
1/2 MS培養(yǎng)基
|
1.495mM
|
0.75mM
|
0.6%
|
1%
|
5.8
|
細(xì)菌培養(yǎng)
|
-
|
-
|
1%
|
1.5%
|
-
|
Reference:
1 Genes involved in cytokinin signal transduction. Kakimoto T. J. Plant. Res. 1998,Vol. 111, 2,261-265.